헤마토크릿 및 삼투압 측정

Ⅰ. 적혈구의 함량(Hematocrit) 측정

(1) 실험목표

▶ 혈액을 원심분리 시켜 혈액에서 적혈구가 차지하는 비율을 측정한다.

▶ 혈액을 원심분리 시켜 혈액 속에 들어있는 백혈구를 확인할 수 있다.

▶ 혈액에서 적혈구와 백혈구가 차지하는 비율이 건강과 어떤 관련이 있는지를 알아본다.

(2) 실험재료

헤마토크릿 원심분리기, 40mm 모세유리관, 튜브밀봉왁스(or 찰흙), 판독판(Hematocrit Reader), 채혈펜, 알콜스왑

(3) 실험과정

① 왼쪽 새끼손가락을 알콜스왑으로 소독한 후 채혈펜으로 찔러 피를 낸다.

② 유리모세관을 혈액에 대고 모세관 현상으로 혈액을 빨아들여 80% 이상 채운다.

③ 실링왁스로 마이크로튜브의 한쪽을 막고 원심분리기에 넣는다. 이 때 왁스로 막은 부분이 바깥쪽을 향하도록 한다.

④ 덮개를 닫고 12,000 rpm 속도로 2분간 원심 분리시킨다.

⑤ 유리모세관를 꺼내어 판독판에 넣고 혈액에서 적혈구와 백혈구의 비율을 측정한다.

<헤마토크릿 원심분리기>                          <판독판>

(4) 배경이론

① 혈액은 혈구와 혈장으로 구성되며 혈구에는 적혈구, 백혈구, 혈소판이 있다.

② 적혈구는 그림과 같이 가운데가 움푹 들어간 원반 모양이며, 산소 운반 단백질인 헤모글로빈이 들어있다. 적혈구의 수는 조절되며 산소가 부족한 고지대에 올라가게 되면 적혈구 수가 증가한다.

③ 백혈구는 아메바 모양으로 체내로 들어온 균을 제거하며 몸에 염증이 생길경우 그 수가 크게 증가한다.

④ 혈색소 비율을 측정하여 건강 상태를 확인할 수 있는데, 대표적인 예가 백혈구수를 측정하여 맹장에 걸렸는지를 확인할 수 있다.

⑤ 혈액을 모세관에 받아 원심분리 시키면 적혈구가 가장 아래쪽에 가라앉고 그 위로 혈장이 맑게 뜨며,

백혈구는 그 사이에 흰색 띠로 나타난다. 백혈구는 그 양이 매우 적기 때문에 자세히 관찰해야 볼 수 있다.

(5) 참고 및 유의 사항

· 상처를 내기 전에 반드시 알콜솜으로 손가락을 소독한다.

· 채혈펜으로 손가락을 찌를 때 상처가 심하지 않게 한다. 손가락 끝 쪽을 팽팽하게 만든 후에 찔러 주는 것이 상처를 내는데 좋다.

· 마이크로 튜브에 혈액이 빨려 올라갈 때 손가락을 눌러주어 피가 잘 나오게 한다.

· 마이크로 튜브에 피를 적게 받았을 경우에는 막대자를 이용하여 색소 비율을 측정한다.

· 피가 들어있는 마이크로 튜브에 실링왁스로 한쪽 끝을 잘 막아주어야 원심분리할 때 피가 새어 나오지 않는다.

· 덮개를 닫고 2분간 원심 분리시킨다.(10,000rpm이상)

· 마이크로 튜브를 꺼내어 판독판에 넣고 혈액에서 적혈구와 백혈구의 비율을 측정한다.

 혈색소 비율 : X/Y X 100

(6) 결과 정리

① 자신의 혈색소 비율 : ( )

② 우리 반의 혈색소 분포

(7) 문제 해결

① 혈색소 측정의 원리는 무엇인가?

② 적혈구 비율이 높다는 것은 무엇을 의미하는가?

③ 마이크로 튜브 안에 혈액 응고 방지제가 들어있지 않으면 어떤 현상이 일어나겠는가?

④ 병원에서는 어떤 사람을 대상으로 혈색소 측정을 하는가?

Ⅱ. 적혈구의 삼투압 측정

(1) 서론

동물의 적혈구의 모양은 소금물의 농도에 따라서 달라지는데, 적혈구와 등장인 소금물에서는 정상적인 모양을 보이나 저장액에서는 팽대하고 고장액에서는 오므라든다. 아주 낮은 저장액에서는 적혈구가 파열하는 경우도 있다. 이 실험에서는 적혈구와 등장인 소금물의 농도를 찾아 삼투압을 계산해본다.

(2) 실험재료

채혈펜, 시험관, 시험관대, 스포이트, 전자저울, 슬라이드글라스, 커버글라스, 현미경, 알콜스왑 NaCl, 증류수

(3) 실험과정

① 10% NaCl 용액과 증류수를 희석하여 여러 농도의 NaCl 용액을 만든 후 각각 다른 시험관에 3mL씩 넣는다.

② 채혈펜으로 손가락 끝을 찔러 각 시험관에 한 방울씩 넣은 다음 잘 흔들어서 고루 섞는다.

③ 시험관대에 나란히 세워두고 각 시험관의 색깔 변화를 비교해 보자.

④ 각 시험관 속의 묽은 피를 스포이트로 슬라이드글라스 위에 떨어뜨려 커버글라스를 덮고 현미경으로 관찰해 보자.

⑤ 각 시험관 속의 적혈구의 모양을 비교하여 관찰해 보자.

⑥ 적혈구와 등장인 소금물의 농도는 몇 %이며, 또 이 용액은 몇 M용액인가?

⑦ 결과로부터 적혈구의 삼투압을 구하여라.(소금물의 해리도는 100%, 온도는 27℃로 가정한다.)

(4) 실험결과 및 토의

실험 결과를 토대로 다음 표를 완성해보자.

※ 주의 : 실험 결과(등장액의 %농도)가 소수 첫째자리까지 나올 수 있도록 실험을 설계한다.